Mattias er tredje søn af Storhertug Cosimo II & Maria Maddalena af Østrig, søster til Ferdinand II. Som ung forfulgte han en kirkelig karriere, men stoppede da det ikke interesserede ham i længden. Som 16årig begyndte han i stedet på en militær karriere, og er blevet en særdeles anerkendt og dygtig militærleder. Han er ofte involveret i krige, og har også et par gange fået den fulde magt over storhertugens militær. Han efterfulgte sin tante, Catherine de’ Medici som guvernør af Siena, og er ganske populær blandt indbyggerne. Han har altid haft en kærlighed til kunst, og er protektor for mange aspirerende kunstner. Mattias er også en dedikeret samler og under en rejse i Tyskland anskaffede han sig diverse videnskabelige instrumenter deriblandt en masse kompasser, som han holder meget af. Han lider desuden af gigt.